Los estudios retrospectivos sobre material tumoral de archivo presentan en ocasiones dificultades de interpretación y significación estadística por la inexactitud de la asignación de la ploidía nuclear y la fase de proliferación en las suspensiones nucleares analizadas por citometría de flujo tras desparafinización de las muestras. Recientemente, se ha mostrado el interés de utilizar el doble marcaje DNA/proteínas nucleares totales (PNT) para incrementar el poder de resoluci¢n y la potencia pron¢stica en el análisis de tumores parafinados por citometr”a de flujo. Hemos realizado un estudio de DNA/PNT por citometr”a de flujo (EPICS Profile II y Elite) en 136 tumores parafinados de laringe, procesados por el método de Hedley y te¤idos con yoduro de propidio (DNA-Prep) y FITC. Hemos encontrado que el contenido en PNT es siempre mayor en los n£cleos aneuploides que en los diploides. Por las limitaciones del estudio en material parafinado, los picos aneuploides se consideran por defecto como hiperdiploides, por lo que el mayor contenido en PNT en los núcleos aneuploides podría simplemente reflejar el mayor contenido en DNA. Para normalizar el contenido en PNT, con independencia del contenido en DNA, hemos definido el índice de proteínas (IP), como el cociente entre las PNT del pico G0/G1 aneuploide y las PNT del pico G0/G1 diploide del mismo tumor. Se ha estudiado la distribución del valor del IP frente al índice de DNA (ID) en los tumores aneuploides, comparándola con la variación del contenido en PNT a lo largo del ciclo celular en los tumores diploides. Se ha comprobado que en estos últimos, el contenido en PNT aumenta con el DNA hasta la parte final de la fase S, como cab”a esperar. Sin embargo, en los tumores hiperdiploides, la representaci¢n del IP frente al ID diferencia dos subpoblaciones de tumores. En el 70% de los tumores aneuploides, el IP es menor (cercano a 1) y no aumenta con el ID. En el 30% de los aneuploides, el IP es mayor (2-4) y aumenta en correlaci¢n con el ID. El estudio clínico muestra que los tumores de este último grupo presentan características anatomo- patológicas diferentes, con mayor agresividad, indicando que el IP podría tener un valor pronóstico a considerar.

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