VALIDEZ DE LOS CORTES TISULARES PARA LA CUANTIFICACION DE ADN POR CITOMETRIA DE IMAGEN EN LOS CCT TRANSICIONALES DE VEJIGA.

M. Alvarez, L. Vicioso, I. Hierro, B. Guerrero-Stranchan y A. Matilla

Dpto. de Anatomía Patológica. Facultad de Medicina. Universidad de Málaga.*Sº de Urología. Hospital Universitario de Málaga.

Planteamiento del tema.- El carcinoma de células transicionales (CCT) muestra un comportamiento evolutivo variable, incluso en pacientes con el mismo grado y estadio. Parámetros como la ploidía de ADN han mostrado correlación con el potencial metastásico, con la respuesta al tratamiento o con la capacidad de recurrencia y/o progresión. El objeto del presente trabajo ha sido; 1) La determinación de la ploidía de ADN, mediante citometría de imagen (CT) en cortes tisulares y citometría de flujo en material fresco (CF). 2) Establecer el grado de concordancia entre ambos métodos y 3) La correlación de los parámetros de cuantificación de ADN con el grado y estadio.

Material y métodos.- Se han estudiado 105 casos consecutivos de RTU vesicales con sospecha clˇnica de CCT primarios de los que se obtuvieron material fresco y bloque de parafina. El grado histológico se valoró siguiendo la clasificación de la OMS, mientras que el estadio patológico se efectuó de acuerdo con la clasificación TNM de la UICC (1978). La CF se realizó sobre suspensiones celulares, marcadas con ioduro de propidio segŁn la técnica de Vindelov siendo evaluadas con un citómetro de flujo (FACScan de Becton Dickinson). La CI en cortes de tejido de 4-5 um de grosor teñidos con Feulgen (CAS DNA Staining) y medidas con un citómetro de imagen (CAS 200, Becton Dickinson).

Resultados.- De los 105 casos, el estudio histológico reveló 1 adenocarcinoma, 4 lesiones inflamatorias y 100 CCT. De estos últimos, 21 (21%) casos fueron G1, 47(47%) G2 Y 32 (32%) G3. Por estadios, 31 eran superficiales (pTa/pT1A), 39 pT1B, 27 casos pT2/3 y 3 pTx. Por CF 53 casos fueron diploides, 31 aneuploides, 13 tetraploides y 3 casos con histogramas no valorables. Con CI y basándonos en la morfología del histograma, 37 casos fueron clasificados como diploides, 29 diploides con exceso de fase S, 26 aneuploides hiperdiploides y 8 aneuploides inclasificables. La correlación del grado y el estadio con la ploidía de ADN determinada por CF y CI fue estadísticamente significativa (p<0.00001). Al comparar la ploidˇa obtenida por ambos métodos se observó un elevado grado de concordancia (p<0.00001).

Conclusión.- En conclusión la determinación de la ploidía de ADN mediante CF y CI es un parámetro complementario al grado y al estadio que ayuda a categorizar subgrupos de CCT. La CI, en cortes de tejido, ha mostrado un valor equiparable a la CF lo que permite el uso de material de archivo y la medición de áreas/lesiones localizadas, con mayor rapidez debido al avance de la metodologˇa actual. Por ello, proponemos estas técnicas como métodos objetivos y reproducibles que deben incorporarse a la rutina diaria para completar la gradación de estos tumores.