Durante el proceso metastático, uno de los factores que determinan la capacidad de asentamiento y el patrón de distribución de las células metastáticas sobre el endotelio capilar, son los glicoconjugados presentes en la membrana de las células tumorales y endoteliales. Teniendo en cuenta este hecho, hemos realizado un estudio sobre los siguientes puntos: a) expresión de los carbohidratos constituyentes de los glicoconjugados de las células endoteliales pulmonares de los ratones C57BL/6; b) expresión de los glicoconjugados presentes en la superficie de las células de la línea tumoral LlcP seleccionada por su mayor capacidad metastática pulmonar, con respecto a la cepa parental Llc. Para efectuar este trabajo, utilizamos la siguiente batería de lectinas marcadas con el fluorocromo TRITC: WGA, Con A, PNA, SBA, PWM y UEA. Perfundimos a través de la arteria pulmonar de ratones C57BL/6, una solución de cada una de las lectinas mencionadas anteriormente. Así, encontramos que el endotelio capilar de la microvasculatura pulmonar mostraba una fluorescencia muy baja o nula cuando se efectuó la perfusión con las lectinas: Con A, PNA, SBA, PWM y UEA; sin embargo se observaba una intensa se¤al con la WGA. Esto indica que los glicoconjugados expresados por las células endoteliales son ricos en residuos Nac-Glucosamina y ácido Siálico, por el contrario se da una pobre o nula expresión de Manosa, D(+)Gal, Nac-Gal, &-D(+)Glc y L-Fucosa sobre las mismas células. La lectina WGA presenta un patrón de marcaje no homogéneo a lo largo de la microvasculatura pulmonar. Hemos descrito tres regiones en el endotelio capilar en función de la intensidad de fluorescencia que este presentaba (alta, media baja o nula). Así pues en la microvasculatura pulmonar se diferencian tres subpoblaciones de células endoteliales en cuanto a la expresión de residuos Nac Glucosamina y ácido siálico sobre su superficie.

Seleccionamos el clon LlcP a partir de la línea tumoral Llc. Para ello, provocamos la formación de metástasis espontáneas pulmonares a partir de un tumor primario subcutáneo en ratones C57Bl/6. Efectuamos explantes de los focos metastáticos, que cultivamos in vitro hasta alcanzar un número de células que permitiera volver a inocular a los animales y repetir la operación descrita. Las células Llc así como las LlcP fueron fijadas en formaldehido al 4% para posteriormente ser incubadas con las lectinas fluorescentes ya nombradas. La intensidad de fluorescencia por unidad celular fue medida por citometría de flujo. En la población de células del clon LlcP encontramos con respecto a la población Llc, un mayor porcentaje de células que expresaban en su superficie los carbohidratos: D(+)Gal, Nac-Gal, &-D(+)Glc y L-Fucosa. No detectamos un incremento en la expresión de estos glicoconjugados por unidad celular. Concluimos así que el incremento de la capacidad para metastatizar de forma espontánea del clon LlcP es paralelo a un aumento, en la subpoblación ya presente en las células Llc, que expresa el fenotipo: PNA+, SBA+, UEA+ Y PWM+.