O. Fornas, E. Mato, J. Pétriz, M.A. Ortíz y S.M. Webb.
En los últimos años se ha descrito la acción antiproliferativa y posible acción antitumoral de la melatonina en distintos modelos experimentales y líneas celulares de neoplasias humanas. Las células RINm5F son una línea celular procedente de un insulinoma de rata.
Objetivo: Valorar el efecto antiproliferativo de la melatonina a dosis farmacológicas (10-6 M) sobre las células RINm5F, así como la expresión en situación banal y a distintos tiempos de incubación de distintas oncoproteínas (c-myc, p53, c-jun) en esta línea celular.
Material y métodos: Se sembraron 106 células RINm5F por placa en medio de cultivo RPMI-1640 + 10% SBF. Para minimizar los efectos de la tripsinización se dejaron 2 días antes del tratamiento, que consistió en una sola dosis de melatonina 10-6M disuelta en etanol. Se valoró la capacidad proliferativa de las c‚lulas RINm5F mediante la cuantificación de la expresión de PCNA y Ki67 (marcadores de proliferación celular) por citometría de flujo a diferentes tiempos de tratamiento (o,1,2,3,4,5,6 horas). Como grupo control, se expuso otras placas de cultivo a etanol, a una concentración final (1%) igual al del grupo de la melatonina, para diferenciar el efecto de la melatonina del posible efecto añadido por el etanol. Asimismo, se evaluó por citometría de flujo la expresión de c-myc, p53 y c-jun en las células RINm5f a 0,2 y 4 horas comparándolo con un grupo control (etanol 1%).
Resultados: Tanto la expresión de PCNA como Ki67 mostraron una caída máxima de la proliferación celular 2 horas después del tratamiento (PCNA de 92% a 72%, P<0.001 y Ki67 de 72% a 51%, P<0.001) que se recuperó completamente a las 4 horas. En el caso del etanol la capacidad proliferativa se mantuvo constante (PCNA de 91% a 89%, Ki67 de 71% a 66%) a lo largo de las 6 horas. La expresión banal de las oncoproteínas fue constante en los controles de etanol, mientras que las tratadas con melatonina la expresión de c-myc (de 42% a 22%) y c-jun (de 60% a 45%) experimentaron un descenso a las 2 h. con tendencia a la recuperación a las 4 h. (c-myc 32% y c-jun 53%). Por otro lado, p53 aumentó a las 2 h. (de 33% a 42%) pero se normalizó a las 4 h.
Conclusión: Se confirma que también en células RINm5F, la melatonina induce una reducción reversible de la capacidad proliferativa y de la expresión de las distintas oncoproteínas.
Financiado por FIS 94/1239