El diagnóstico y clasificación de las leucemias agudas sigue basándose en gran medida en el análisis morfológico y citoquímico de las células neoplásicas. No obstante, la falta de reproductibilidad de estos criterios y la dificultad para clasificar algunos pacientes han llevado a la búsqueda de otros parámetros que pudiesen contribuir a mejorar el diagnóstico y la clasificación de las leucemias agudas. Desde la producción de los primero anticuerpos monoclonales dirigidos frente a antígenos leucocitários se ha pensado en la posible utilidad del inmunofenotipaje de leucemias en este campo fundamentalmente con la realización del inmunofenotipaje de las células leucémicas por citometría de flujo. Desde entonces el fenotipaje de las hemopatías malignas ha constituido un importante complemento de los métodos convencionales en el estudio de las leucemias agudas. Su contribución ha llevado no sólo a la confirmación diagnóstica sino que además ha permitido avanzar en la identificación de determinados subgrupos difícilmente clasificables desde el punto de vista morfológico. Así en la actualidad el diagnóstico y clasificación de las leucemias agudas se apoya en gran medida en los estudios inmunofenotípicos por citometría de flujo. La disponibilidad de marcadores celulares altamente específicos de las diferentes líneas hematopeyéticas como la mieloperoxidasa (MPO) para la serie mieloide y los antígenos CD3 y CD79 que, asociados o no a la presencia de receptores antigénos (TCR e igs), son altamente específicos de línea linfoide T y B, respectivamente. La combinación de estos marcadores con la detección de otros antígenos asociados a alguna de estas líneas (CD13, CD33 para la serie mieloide, CD2, CD5, CD8 para la serie linfoide T y CD22, CD19, CD20 para la línea B) ha permitido realizar un diagnóstico de la línea involucrada e identificar nuevos subgrupos de leucemias como las leucemias agudas bifenotípicas, las leucemias agudas linfoblásticas (LLA) con expresión de antígenos asociados a línea mieloide y las leucemias agudas mieloblásticas (LLA) con expresión de antígenos relacionados con la serie linfoide. Además la utilización combinada de estos marcadores con otros antígenos relacionados con estadios madurativos normales -- antígenos de diferenciación-- ha permitido establecer subgrupos de leucemias agudas de indiscutible valor clínico dentro de cada uno de las tres líneas anteriores. Así mismo, el inmunofenotipaje de leucemias ha permitido la identificación de algunos subgrupos de pacientes portadores de anomalías citogenéticas concretas como las traslocaciones t(15;17) y t(8;21) y la caracterización de subgrupos morfológicamente difíciles de identificar como las LAM M0, M7 y la forma variante de M3.

No obstante, la relevante contribución del inmunofenotipaje de las leucemias agudas por citometría de flujo, un examen detallado de la literatura muestra un inquietante nivel de variabilidad que llega a poner en cuestión la objetividad del método. Tal variabilidad se ha relacionado con diferentes factores como la calidad y el tipo de muestra, la preparación de la muestra, los reactivos e instrumentos, la adquisición, análisis e interpretación de datos. Todo ello conlleva a la necesidad de un proceso de estandarización que involucre a todos estos aspectos, proceso que se ha iniciado en los £ltimos a¤os y en el que trabajan diferentes instituciones y grupos científicos. En términos generales, el inmunofenotipaje de las células blásticas de pacientes con leucemias agudas debe buscar: 1) la identificación de todas las células blásticas presentes en la muestra, 2) la identificación de subpoblaciones de células leucémicas y 3) la caracterización fenotipica de cada una de las subpoblaciones de células blásticas detectadas. Además el estudio de la expresión de cada antígeno debe de centrarse en tres aspectos distintos analizando si un antígeno está presente o ausente en las células blásticas de cada subpoblación, si su expresión es homogénea o heterogénea y finalmente en que cantidad se expresa. La obtención de forma estandarizada de este tipo de información, permitirá sin duda en el futuro la comparabilidad de resultados obtenidos entre pacientes estudiados en un mismo hospital y diferentes centros además de permitir establecer el valor del inmunofenotipaje en el diagnóstico, valoración pronostica y en la monitorización de los pacientes con leucemias agudas.

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