Introducción: Las modificaciones en el número de células proliferantes en fase de Síntesis (S) y G2-mitosis se han descrito en relación con diversos procesos neoclásicos, y reflejan cambios en la capacidad proliferativa de las células inmaduras independientemente de las alteraciones en el contenido de DNA que presenten las células. La afectación clonal de los pacientes con síndromes mieloproliferativos crónicos SMPC se caracteriza por un aumento de proliferación celular. La posibilidad de estudiar la distribución del ciclo celular mediante citometría de flujo permite disponer con rapidez y eficacia de la dinámica celular.

Objetivo: Analizar la utilidad de determinar el número de células proliferantes mediante citometría de flujo en el diagnóstico de los SMPC.

Material y métodos: Se analizó la distribución y contenido de DNA en 25 muestras de médula ósea procedentes de pacientes con diagnóstico o sospecha de SMPC y en 15 pacientes sin signos de presunción de neoplasia hematológica. Todas las muestras de médula se anticoagularon con heparina libre de aditivos y las células mononucleadas se aislaron mediante centrifugación con Ficoll-Hypaque y prepararon tras lavado a una concentración de 2x106/ml. Los núcleos se tiñeron a continuación con yoduro de propidio mediante el método de Vindelov y se analizó el contenido de DNA y distribución de células en fase G0-G1, S, G2-M e índice de proliferación (S-+G2-M) mediante con un citómetro de Flujo FACSscan, programa Cell-Fit.

Resultados: El coeficiente de variación fue inferior a 2.8. En los estudios realizados con muestras de pacientes sin neoplasias hematológicas la distribución de las células en el ciclo celular fue: 85% en G0/G1, 10+-1% en S y 3+-1% en G2-M, el índice del contenido de DNA fue 1. En 16 pacientes estaba aumentado el porcentaje de células en S, en 6 el de células en G2-M, en 6 el de células en S y en G2-M y en 11 el índice de proliferación S+G2M. Todos los pacientes con aumento de células en fase S o S+G2-M correspondieron a SMPC confirmados por histología. Ningún paciente presentaba exclusivamente aumento de células en G2-M. Los pacientes con distribución celular normal fueron 5 casos no confirmados como SMPC, 2 policitemias y 2 trombocitemias esenciales tratadas y con parámetros normales en el momento del estudio. En ninguno de los pacientes se detectaron alteraciones en el contenido de DNA. El aumento de células en S y en G2-M coincidía con formas avanzadas de la enfermedad. Ningún paciente con cambio reactivos presentaba alteración de estos parámetros.

Conclusión: Los resultados obtenidos revelan que el análisis del ciclo celular es de ayuda en el diagnóstico de síndromes mieloproliferativos crónicos, confirmando aumento del porcentaje de células en fase S y del índice de proliferación celular.

Trabajo realizado con ayuda FISS: Proyecto Nº 94/473.