LOCALIZACION DE LOS MASTOCITOS EN MEDULA OSEA Y SANGRE PERIFERICA
MEDIANTE CITOMETRIA DE FLUJO.
J. Villarrubia*, A. Orfao**, L. Escribano*, J.L. Velasco*, R. Quiroga*, J.L.
Navarro* y J.F. San Miguel**.
*Servicio de Hematología, Hospital Ramón y Cajal, Madrid.
**Servicio Central de Citometría , Hospital Clínico Universitario de Salamanca.
***Servicio de Hematología, Hospital Clínico Universitario, Salamanca.
OBJETIVOS:
El mastocito humano (MC) expresa dos receptores de membrana muy
característicos, el receptor de alta afinidad para la IgE (FcERI) y el receptor
para el MGF o SCF (c-kit o CD117). Sin embargo, el FcERI está presente
también en los basófilos, así como en alguna
subpoblación de linfocitos y macrófagos. Por otra parte, el c-kit es
expresado también por un pequeño porcentaje de células de
médula ósea (MO) normal (1-4%). Presentamos un estudio
multiparamétrico mediante citometría de flujo de los MC de MO y
sangre periférica (SP) con el fin de establecer cuales son las combinaciones
adecuadas de anticuerpos monoclonales (AcMo) para su
localización, así como sus
características de FSC/SSC.
METODOLOGIA:
Hemos estudiado la MO de 9 pacientes con hiperplasia reactiva
de Mc (5 casos de LLC, 1 de LNH, 2 enfermedad de Waldenström y 1
síndrome mielodisplásico), 2 urticarias pigmentosas, y 4
mastocitosis sistémicas (MS), así como la SP de 3 MS y 2 urticarias
pigmentosas. El estudio se realizó mediante técnica de lisis. Los
paneles de AcMo empleados fueron los siguientes: CD34/CD117/CD45,
CD33/CD117/CD45, CD13/CD117/CD45, anti-IgE-CD117-CD45, anti-IgE-CD117-
CD38. La adquisición se llevó a cabo con un FACScan (Beton-
Dickinson) mediante el programa LYSYS II. Para los estudios de MO se adquirieron
10.000 eventos por tubo y 30.000 para la SP. Se realizó una segunda
adquisición mediante una "live gate" en SSC/CD117+. El análisis
de los datos se realizó con el programa PAINT-A-GATE plus
(Becton-Dickinson ).
RESULTADOS:
Los MC fueron identificados con todos los paneles de AcMo
empleados en base a su alta expresión de CD117 o IgE. Respecto a sus
características de FSC/SSC, los MC se localizaban en la región
correspondiente a los monocitos y granulocitos inmaduros. El número de MC
identificados fue variable oscilando entre el 0,003% (3 MC entre 10 5 células) y
el 0,1% en MO de mastocitosis reactivas, llegando hasta el 40% en MS. En SP
osciló desde 0% hasta un 1,5% en MS. La citometría de flujo
constituye un excelente método para la localización y recuento de MC tanto en MO
como en SP.