Dpto. de Bioquímica y Biología Molecular. Universidad de Valencia.

El análisis del contenido en DNA por citometría de flujo es de gran importancia clínica para el diagnóstico y pronóstico en diferentes síndromes linfoproliferativos. Este tipo de análisis, clásicamente, se ha dirigido a la evaluación de la ploidía y la capacidad proliferativa de los tumores. Recientemente, además, se ha demostrado que la presencia de apoptosis, un parámetro detectable por análisis citométrico de DNA, puede tener valor pronóstico en algunos síndromes linfoproliferativos, como los linfomas de bajo grado. Por tanto, es de inter‚s el poder abordar conjuntamente los mencionados aspectos para la caracterización del comportamiento biológico y la respuesta a la terapia de estas patologías. Sin embargo, la heterogeneidad de las poblaciones celulares implicadas en los tejidos linfoides y hematopoyéticos, puede complicar la interpretación de los datos citom‚tricos o enmascarar la presencia de subpoblaciones de diferente comportamiento.

Hemos aplicado la citometría de flujo (EPICS XL y Elite) al estudio del contenido en DNA de muestras frescas, procedentes de m‚dula ósea o ganglios linfáticos de pacientes con leucemia linfática crónica y linfoma de bajo grado. Las muestras fueron procesadas por el sistema DNA-Prep para la tinción de DNA con yoduro de propidio/RNasa.

Los resultados obtenidos muestran que las muestras preparadas por este sistema mantienen una heterogeneidad morfológica en los histogramas de dispersión frontal y lateral, de dispersión frontal frente a fluorescencia naranja de DNA y de dispersión lateral frente a fluorescencia naranja, se observa que se pueden distinguir, claramente, en muchos casos, subpoblaciones claramente diferenciadas, con distintas caracterˇsticas de ploidˇa nuclear, distribución del ciclo celular y presencia de apoptosis. Estos datos pueden ser de importancia para estudiar mejor la heterogeneidad funcional celular en síndromes proliferativos.