La apoptosis es un proceso controlado a través del cual las células pueden morir mediante programas codificados genéticamente, como en la embriogénesis, metamorfosis, maduración e involución de tejidos. La apoptosis puede ser inducida en respuesta a factores nutricionales o a señales específicas del entorno celular o por la acción letal de un amplio rango de agentes químicos y físicos, de especial interés en la terapia antitumoral. Se ha implicado a diversos productos génicos en el mecanismo de la muerte celular. Sin embargo, los mecanismos bioquímicos concretos que participan en el proceso son, esencialmente, desconocidos. Recientemente, se ha implicado al estrés oxidativo entre las posibles señales que desencadenan la apoptosis en algunas condiciones (radiación ionizante, infección viral, etc.).

Hemos investigado el papel del estrés oxidativo y la función mitocondrial en la apoptosis inducida por ausencia de factores de crecimiento, utilizando como modelos experimentales el cultivo de Hepatoma N13 de rata tras reducción de suero bovino al 1% (control = 10%) y en presencia de bajas concentraciones del agente peroxidante, Hidroperóxido de tert-Butilo). El estudio funcional se ha realizado por citometría de flujo (EPICS Elite) en células vivas, apoptóticas y necróticas, seleccionadas por la exclusión del yoduro de propidio, utilizando fluorocromos específicos (Rhodamina-123, Dihidrodiclorofluoresceína diacetato, Naranja de Mercurio).

Nuestros resultados demuestran que, en ambos modelos, la apoptosis está precedida por una disminución del potencial de membrana mitocondrial, un aumento de la concentración de especies reactivas del oxígeno y una disminución de los niveles de glutátion en las células vivas. Estos resultados muestran la implicación del estrés oxidativo y alteraciones de la función mitocondrial en la inducción de apoptosis en diferentes situaciones.

Patrocinado, en parte, por la Consellería de Educació i Ciencia de la Generalitat Valenciana (GV -2503/94) y el Fondo de Investigacion Sanitaria (95/0032-02).