Introduçâo: Nas recentes recomendaçôes deo C.D.C. para imunofenotipagem linfocitária em doentes com H.I.V., apresentaram-se novas alternativas (i.e. imnoflurescência tricolor) às anteriores (painel de seis tubos com imnoflurescência bicolor). Actualmente, utilizamos a fenotipagem tricolor nestes estudos, que antes eram feitos com fenotipagem bicolor anti CD4/ anti CD8.

Objectivo: Avaliaçâo das determinaçôes da percentagem de linfócitos CD4+ utilizando o reagente anti CD4/CD8, através do estudo comparado com o reagente tricolor anti CD3/CD4/CD8.

Material e Métodos: Estudámos 27 individuos adultos, sem doença aparente. Todas as determinaçôes foram feitas a partir de mesma amostra, preparada com o sistema Qprep e analisada num citometro XL- Profile. Nos 15 primeiros duplos estudos, foi utilizado o Q-Prep semi- automático, e nos restantes um Multi-Q-Prep. Em todos os 27 casos se incluiram controlos isotípicos, e os reagentes foram anti CD4/CD8 ("Coulter"), anti CD45/CD14 ("Coulter"), anti CD3/CD4/CD8 ("Ortho") e anti CD3/CD19/CD16 ("Ortho").

A populaçâo linfocitária foi definida através de um "gate" electrónico de FS/SS, tendo sido mantidos os "settings" do citómetro de FS e SS em todos os casos. A qualidade da amostra observada no citometro foi sempre considerada boa. Resultados (Média; valores extremos): A pureza do "gate" e a recuperaçâo de linfocitos no "gate" foi determinada com CD45/CD14. A imunosoma calculada com CD3/CD19/CD16. A variabilidade intertubo de % de CD3+ com CD3/CD4/CD8 e CD3/CD19/CD16. A variaçâo de linfocitos CD4+ com CD4/CD8 e CD3/CD4/CD8:

Qprep:

* Pureza: 98% (94.9-99.4)

* A existência de diferenças significativas na qualidade dos resultados obtidos entre as amostras dos dois grupos em que a unica diferença foi o tipo de equipamento usado na preparaçâo leva-nos a reforçar a ideia da importancia da qualidade da preparaçâo da amostra e da necessidade de um apertado sistema de manutençâo e controle desses equipamentos.